分享丨微生物日常检验过程中的注意事项！

在微生物检验操作过程中，要保证检测环境（如超净台、检测室）以及所用工器具的洁净程度，同时保证人员各种操作的规范性，尽量保证其无菌性，防止因人为原因操作失误而出现误差结果，同时在适宜温度进行培养，为合理决策和指导生产提供依据。为保证检测结果的准确性，我们应做好以下几个方面：

检测室：

1.检测时，窗户和空调要关闭，或用酒精对房间进行喷雾消毒，避免房间内空气流通影响超净台内部环境（最好在有通排风系统的恒温恒湿无菌间进行操作）。

2.如果在原来的原料微生物检测室进行检测，要定期开启紫外灯，对房间进行杀菌。

1.洁净室（无菌室）是微生物检测的重要场所与最基本的设施。它是微生物检测质量保证的重要物质基础。因此它的设计要按国家标准《洁净厂房设计规范》、国家药品监督管理局颁发的《药 品检验所实验室质量管理规范（试行）》中第十八条规定执行。微生物实验室洁净室的施工、安装、验收应按国家行业标准《洁净室的施工及验收规范》执行。对于微生物检测工作者和使用管理者来讲，更大量的工作是进行正常管理到日常的使用。洁净室（无菌室）的标准要符合GMP洁净度标准要求。

1.定期清洁初效过滤器，要及时更换。

2.检测前，将超净台内部进行清洁，用75%酒精进行擦拭消毒，并提前半小时将超净台紫外灯打开，对超净台内部环境进行杀菌。

3.关紫外灯，开风机，调整合适进风量，风量不可过低。

4.每次检测后，要对超净台内部进行清理、清洁，并用75%酒精进行擦拭消毒。

5.紫外灯根据其使用寿命要及时更换。

6.检测同时，要做上相应菌落检测的环境空白。

7.检测区域的选择：

a、一般在距离超净台外沿的1/3-2/3区域进行无菌操作；

b、要在酒精灯火焰的外焰保护区域进行操作。

1.玻璃器皿：采用干热灭菌方式进行灭菌，保证恒温、时间足够（但不可时间过长，容易导致玻璃器皿易裂纹而报废）。

2.取样筐：使用前要用75%酒精进行喷洒消毒。

3.取样勺：要保证其清洁消毒，清洁后用75%酒精进行擦拭消毒。

4.取样袋：可先用酒精进行擦拭消毒，再在超净台用紫外灯照射消毒，（包装车间要在传递窗用紫外灯照射消毒）。

5.电子称表面用75%酒精消毒。

1.保证手部的清洗、消毒：取样前及检测前都要先洗手再消毒。

2.取样要具有代表性（随机样、目的样、综合样）且要标示清楚。

3.取样完毕，不可在车间逗留，要及时将样品放入超净台，对其外表面进行紫外灯照射消毒。

4.在要求的检测区域进行操作。

5.检测前，要用75%酒精棉球对样品袋口部进行擦拭消毒，再开口。

6.往盐水瓶加样品时，要注意勺子或袋子尽量不接触瓶口。

7.样品计量要准确，稀释倍数也要准确（1mL吸管不允许将管口敲掉），进行100倍稀释时，1mL吸管要伸入盐水中，不可以将样品从管壁流下去，同时要避免将管底部捅破。

8.盐水温度以40℃左右为宜，不能过热，会将部分微生物烫死；也不能温度太低，不能将样品溶解完全。

9.进行稀释时，要摇匀，保证溶液的均一性。

10.倾倒平皿时，要注意培养基瓶口不要接触到平皿；倾倒的培养基要适量，不可以太少，在培养过程中易干掉，微生物亦死亡，以15mL左右为宜。

11.做大肠菌群样时，要提前将乳糖胆盐培养基培养管按需要量备好，放入超净台对外表面进行紫外线灭菌。

12.接二步时，要注意先将接种针（环）进行冷却，避免出现接不上菌落的情况，导致无法判断、确认。

13.检测完毕，及时放入相应培养箱进行培养，并清理清洁超净台。